Kiváló minőségű adenozin-deamináz vizsgálati készlet

Az adenozin-deamináz (ADA) egy természetes enzim, amely részt vesz az immunválaszban. Az adenozin-difoszfát (ADP) funkciója a sejtek aktiválása, membránpermeabilizáció és citotoxikus hatás kifejtése. Az adenozint az emberi agy normális működéséhez szükséges egyik legfontosabb aminosavként azonosították. A máj szintetizálja, és az immunrendszer működése révén eloszlik a vérplazmában. Az adenozin-difoszfát a vírusellenes genetikai anyag hordozója. A Biomedical Expo kiállításon az ADA Activity Assay Kit-et a korábban említett BioVision Cytokinnel kombinálva fogják használni.

Az adenozin-difoszfát (ADP) a T-limfocita növekedési faktor hordozója. A BioVision Cytokinben az adenozin-deaminázt (ADO) extrahálják a feldarabolt veséből, és a kereskedelemben kapható spektrofotometriás automatizált assay segítségével elemzik. A reagenst anti-foszfo-dglükózzal (PI) előkezeltük, hogy megakadályozzuk a reakciót az analittal.

A kereskedelemben kapható AIDA Activity Assay Kit összetétele két fő komponenst tartalmaz - a reagenst és a laboratóriumi berendezést. Az Aida Activity Assay Kitben található reagensek tisztított enzimkoktélt (Sigma-FCA) tartalmaznak. A laboratóriumi felszerelés egy mikrolemez-szkennerből (üvegmikroszkóp tárgylemez mögé szerelve), üvegedényekből, standard görbe eredmények könyvéből és öblítőpalackból áll. Használat előtt az Aida Activity Assay Kit mintáit klórmentesített vízzel le kell mosni. A reagensek és a laboratóriumi felszerelések használata nem korlátozódik a laboratóriumi vizsgálatokra.

Annak vizsgálatára, hogy az Aida Activity Assay Kit képes-e mérni a teljes adenozin-deamináz aktivitást, több kísérleti munkamenetet végeztünk. Az első ülés négy napos kézi nyomkövetésből állt. Százötven mikroliter Aida-GFP-t feloldottunk csapvízben, és összekevertük foszfáttal pufferolt sóoldattal. Húsz perc elteltével a mintákat HPLC tömegmérleg képernyőn teszteltük.

A második munkamenet további két napos kézi nyomkövetést tartalmazott. A mintákat a görbe kazettára fecskendeztük két órán át a fent leírtak szerint. A harmadik ülés három további napos manuális nyomkövetést tartalmazott ugyanabban a helyiségben, majd négy órányi adenozin-deamináz (ADCA) szubkután injekciót. A vérmintát egy óra elteltével vettük az elemzéshez.

A nyálvizsgálathoz 500 mikroliter dezamináz és pH-emelkedés standard oldatát kevertük össze egy nem steril lyukasztóban. A sertések tetszés szerint sokféle folyadékot ihattak, a sima víztől a diétás szódáig. Amikor a standard oldatok elérték a forráspontjukat, egy előre meghatározott mennyiségű nyállal ellátott cseppentőt helyeztünk be, és megmértük az adenozin-deamináz aktivitást.

Az utolsó hat mintából álló csoportot a kereskedelemben kapható Saliva-based Phosphorimidazoleamine Assay Kit (Saproflavil; Thermo Instruments) segítségével elemeztük. Ebben a vizsgálati sorozatban egyetlen csepp foszforimidazol-amin/nyál ada reagenst kevertünk össze csapvízzel, és a szárított port adtuk a mintákhoz. Harminc perc elteltével ugyanabból a mintából egy második mintát vettünk. Ebben az esetben a nyál aktivitását azonnal megmértük. A készletet kifejezetten az emberi nyálban lévő sav aktivitásának mérésére tervezték. Ahogy az várható volt, jelentős mennyiségű tevékenység volt kimutatható.

Ahogy az várható volt, mindkét analizátor hasonló eredményeket produkált. A nyál-pozitron emissziós tomográfia (SPECT) elemzés rendkívül specifikus jellege, valamint a rendkívül érzékeny módszertan (magas intraorális folyadék detektálás) következetesen nagy pontosságot és jelentős méréseket eredményezett. Az eljárásokhoz használt laboratóriumi személyzet mind a terület szakértője volt. Nem volt bizonyíték szennyeződésre vagy bármilyen kísérleti hibára. A kísérleti alanyok tájékozott beleegyezésüket adtak, és az eljárás az Amerikai Klinikai Endokrinológusok Szövetsége ajánlásait követte. Összességében az Adenosine Deaminase Assay Kit segítségével kapott eredmények jó reprodukálhatóságot mutattak, amit független klinikai laboratóriumok külön tanulmányai is megerősítettek.