A NEFA Assay Kit egy eszköz a NEFA számszerűsítésére

NEFA Assay Kit egy eszköz a NEFA (nitrogén-oxid) mennyiségi meghatározására. A NEFA koncentrációjának meghatározására szolgál vér- vagy szövetmintákban. A NEFA létfontosságú tápanyag, amely felelős az energia-anyagcsere szabályozásáért, a szív ingerlékenységéért, a neuromuszkuláris vezetésért, a vérnyomásért és a véralvadásért. Főleg csontokban, izomzatban, lágyszövetekben és vörösvértestekben található.

Készítmény

A NEFA egy kicsi, 50,2 kDa-os fehérje, amely képes kötődni a DNS-hez. Ez egy citoszolikus I. típusú zsírsav-szintáz (FAS) komplex, amely nem észterezett palmitinsavat termel. Acil-CoA-oxidáz (ACS) jelenlétében a FAS-komplex a 3-metil-N-etil-N-(b-hidroxi-etil)-anilint 4-amino-antipirinné oxidálja, amely az acetil-CoA molekuláris prekurzora. Ez a folyamat döntő fontosságú enzimatikus folyamat minden eukarióta szervezet számára.

Noha a NEFA nem rendelkezik akkora tömeggel, mint egy zsír, fontos üzemanyagforrás a perifériás szövetek számára. A májban metabolizálódik, és albuminnal komplexben szállítódik a perifériás szövetekbe. A NEFA-t a FAS komplex tioészteráz (TE) doménje is felszabadítja.

Pipettázás

Az ELISA készleteket kis kémiai vegyületek, fehérjék és peptidek kimutatására használják. Ezek a készletek E. coliban expresszált rekombináns fehérjéken alapulnak. A készletek nem tartalmaznak azidot, timerosalt és más természeti erőforrásokat.

A készletben olyan reagensek találhatók, mint a BSA, a pirogénmentes hígítópuffer és a mosóoldat. A mosóoldat 2-8°C-on két hétig stabil. A hígítópuffer 0,9% fiziológiás sóoldatot tartalmaz.

A készlet belső NEFA szabványt tartalmaz. Ezt a NEFA-val olyan koncentrációban növelik, amely megegyezik a minta várt koncentrációjával. A kék-lila pigment abszorbanciáját 546 nm-en mérjük a NEFA-koncentráció kiszámításához a mintában.

Kolorimetriás

A WAKO NEFA készlet használata sokféle eredményt hozott, köztük olyanokat is, amelyek értelmetlenek. Ennek ellenére a NEFA készlet méltó versenyző az állati szövetminták relatív zsírsavtartalmának meghatározásában. Mint ilyen, a NEFA készlet az egyik legnépszerűbb laboratóriumi teszt. A készlet utasításokat tartalmaz a különböző típusú minták, köztük a vér, szérum, nyál és különféle lipidek vizsgálatához.

A készlet legizgalmasabb része, hogy különféle zsírsavak mérésére használható, beleértve azokat is, amelyek általában megtalálhatók a lipidekben. A készlet számos enzimet tartalmaz, amelyek különféle zsírsavak kimutatására szolgálnak, beleértve az emberekben és állatokban található C-8 és C-16 zsírsavakat. Ennek ellenére a készlet nem ajánlott nagy pontosságú FFA-koncentrációk széles tartományban történő használata.

Elektrokémiai

A NEFA-k fontos zsírsavak az emberi egészségben, de ritkán értékelik őket. Ráadásul a felderítésük nagyon költséges. Ezért a koncentrációjuk változásának nyomon követése segíthet a betegségek pontosabb megelőzésében és kezelésében. Ebben a tanulmányban egy elektrokémiai vizsgálati készletet fejlesztettek ki a NEFA-hoz, PDA-MWCNT-t használva szenzorfelületként. Ez az elektróda jó elektrokatalitikus aktivitást mutatott a NEFA oxidációs lépéseiben, és valós alkalmazásokban is használható volt.

Az enzimelektróda PDA-MWCNT-ből és ACOD-ból, ACS-ből és polimerből álló többrétegű kompozit filmből állt. A rétegek sorrendjét úgy választottuk meg, hogy az megfeleljen az enzimatikus reakció sorrendjének. Megállapították, hogy az ACS és az ACOD biológiailag aktívak maradtak a filmben.

NEFA koncentráció a T2D-ben

A vér NEFA-koncentrációját az elhízás és a magas vérnyomás összefüggésében tanulmányozták. Ezekről a vegyületekről kimutatták, hogy az a1-adrenerg stimuláció révén elősegítik a vérnyomás emelkedését és növelik az oxidáns stresszt. A NEFA-k szintén összefüggenek a metabolikus szindrómával. Ezek a vegyületek fontosak lehetnek a magas vérnyomás kialakulásában.

Számos modellt javasoltak az intravénás glükóz kihívásra adott plazma NEFA válasz leírására. A bostoni modell pontosan ábrázolta a NEFA-koncentráció növekedésének negyedik fázisát. A modell azonban nem írta le a kezdeti látencia fázist. A Fabian-modell egyszerű exponenciális meredekséget alkalmazott ennek a fázisnak a leírására. Hasonlóképpen, a Thomaseth-modell nem tudta leírni a visszapattanási fázist.

NEFA szint a trigliceridekben

Számos tanulmány vizsgálta a bariátriai műtétek hatását a plazma NEFA összetételére. Egy 2016-ban közzétett metaanalízis szerint a szérum NEFA-szintje csökkent a műtét után 6 és 12 hónappal. Ennek oka lehet az inzulinszint csökkenése. Egy másik tanulmányban a plazma NEFA-t mérték elhízott betegek csoportjában a Roux-en-Y gyomor-bypass műtét előtt és után.

Hét NEFA koncentrációja csökkent a műtét után 9 hónappal. A linoleát (egy omega-6 zsírsav) 18:2-re, a sztearát 18:0-ra, az oleát 16:0-ra csökkent. A dokozahexaenoát koncentrációja azonban nem változott. A NEFA-kat zsírsav-metil-észterekké (FAME-k) alakították át. Ezeket azután gázkromatográfiás tömegspektrometriával (GC-MS) elemeztük.